大白鼠的體形雖比小白鼠大得多，但其繁殖力、產仔數、性周期與小白鼠幾乎一樣，素以高、多、短而聞名 。繁殖力高，約1月1胎；產仔數多，每胎8 - 12只；性周期短，為4-5天 。
在正常情況下，公鼠23 - 25日齡睪丸開始下降，30 -35日齡完全進入陰囊，45 - 60日齡產生精子；母鼠在70 -75日齡陰道開口，并初次排卵 。在60日齡時，大白鼠就有性行為表現，這時母鼠陰道口張開，公鼠的生殖器官產生精子 。但還不適宜交配繁殖，若過早配種，仔鼠發育不良，死亡也多 。最適繁殖日齡，公鼠為90日齡，母鼠為80日齡 。【大白鼠繁殖習性 大白鼠繁殖糧配方】
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母鼠多于夜間發情，并于發情第2天排卵，此時若與公鼠交配即可受孕 。但身體強壯、性欲旺盛的公鼠能強迫母鼠在非發情期接受交配，并能促使其排卵受孕 。一般采用1公1母長期同居頻密交配繁殖，母鼠在分娩后48小時或斷奶后2-3天即可發情配種 。也可采取一公多母同籠交配法，每周檢查母鼠，將臨產母鼠放進單籠分娩，待幼鼠斷奶后再放回原籠 。
大白鼠人工繁殖一般可以采用2種辦法，一種是如果空間夠大還有母鼠生產時間基本相同就可以不分窩,等4周左右把新生鼠取出,另一種是將即將分娩的母鼠單獨提出飼養，知道產子后3周和小鼠分開然后放回原來的群組，幼鼠繼續單獨飼養 。
大白鼠為多發情動物，無明顯的季節性差異 。性周期為4-5天，妊娠期為21天，哺乳期為25 - 28天，仔鼠體重達到50克時即可斷奶 。公母鼠使用期一般為1年左右 。
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