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菌種保藏操作步驟 菌種怎么制作，菌種保藏方法

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菌種保藏操作步驟 菌種怎么制作，菌種保藏方法

文章插圖
回答1、將土豆切成塊 ， 放入燒杯中煮半個多小時 ， 煮好后過濾溶液備用 。2、將瓊脂放入溶液中 ， 然后重新將其燒開 ， 瓊脂完全溶化后繼續煮一段時間 。3、煮好后將汁液分放至試管內 ， 并用高壓鍋消毒殺菌 ， 消毒后斜放試管 ， 待凝固后開始接種 。4、用酒精對嫩蘑菇進行殺菌 ， 并在無菌箱內將其切成小塊 ， 切好后可接種至瓊脂基質上 。5、堵上試管口 ， 將瓊脂基質放入培養箱 ， 長滿菌絲后便可形成一級菌種 。
一、菌種怎么制作
1、一級菌種
（1）向燒杯內放入切成塊的土豆 ， 然后煮30多分鐘 ， 煮好后過濾溶液備用 。
（2）向溶液內放入瓊脂 ， 再將其燒開 ， 待瓊脂完全溶化后繼續煮一段時間 。
（3）煮好后 ， 將汁液分放至試管 ， 再用高壓鍋消毒殺菌 。消毒后將試管斜放 ， 直到冷涼凝固后即可開始接種 。
（4）用酒精對嫩蘑菇做殺菌處理 ， 然后在無菌箱內切成小塊 ， 接種至瓊脂基質上面 。
（5）用塞子堵上試管口 ， 再將瓊脂基質放入培養箱內 ， 待長滿菌絲后即可形成一級菌種 。
【菌種保藏操作步驟 菌種怎么制作，菌種保藏方法】 2、二級菌種
（1）將煮熟的大豆和谷粒置于無菌的條件下晾干 ， 再裝入經過高溫殺菌的玻璃瓶內 。
（2）將瓶子封口 ， 放入高壓鍋中 ， 經高壓滅菌后放在無菌室冷涼 。
（3）將培養瓶放至無菌箱內 ， 再放入一級菌種 ， 用的小匙挖出黃豆大小的菌種接種入玻璃瓶 。
（4）接種后要封口 ， 再將玻璃瓶放到培養室中 ， 待長滿菌絲后即可備用 。
3、三級菌種
（1）制備方法與二級菌種基本一致 ， 培養基可使用煮熟的麥粒、玉米粒及棉籽 。
（2）三級菌種的菌絲長滿后即可取出來培育 ， 經歷三級菌種的培育后可完全制成平菇菌 。
二、菌種保藏方法
1、斜面低溫保藏法
將菌種接種至適宜的固體斜面培養基上 ， 待菌種充分生長后用油紙將棉塞部分包扎好 ， 然后放入冰箱 ， 溫度控制在2-8℃即可 。
2、甘油管保存法
（1）將80%甘油用高壓蒸汽做滅菌處理 ， 再將菌種放置在斜面培養基上培養 ， 用無菌水制成高濃度的菌懸液 。
（2）將1毫升甘油與菌液混勻 ， 使甘油的濃度達到10-30% ， 然后放在-70℃的環境中凍存 。
3、液體石蠟保藏法
（1）將液體石蠟裝入三角燒瓶內 ， 塞上棉塞 ， 包扎好牛皮紙 ， 然后放在0.1MPa、121.3℃的環境中滅菌半小時 。
（2）滅菌后 ， 將燒瓶轉移至40℃的溫箱內蒸發水汽 。
（3）在斜面培養基內培養菌種 ， 得到健壯菌體 ， 再用滅菌吸管注入石蠟 ， 注入量以高出斜面頂端1厘米為宜 。
（4）將試管直立 ， 最后放在低溫或室溫環境中保存即可 。

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