雞馬立克氏病病毒的實驗室診斷 烏魯木齊師范大學溫泉校區怎么樣

【雞馬立克氏病病毒的實驗室診斷 烏魯木齊師范大學溫泉校區怎么樣】從病雞和許多外表正常的雞體中都不難分離出病毒株 。供分離病毒用的首選樣品是腫瘤細胞、腎細胞以及脾或周圍血液的白細胞 。由于mdv在這些組織中是高度細胞結合性的 , 所以必須用全細胞作為接種物 。羽毛囊是從病雞中分離完整病毒粒子的唯一良好來源 。被懷疑含有mdv的樣品 , 可以用接種易感雞、細胞培養物和雞胚的方法來分離病毒 。

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雛雞接種法:這是分離mdv最敏感的方法 。選擇易感雞 , 在1日齡或l周齡內用腹腔接種的途徑進行感染 , 然后嚴格隔離飼養觀察 。接種后經18 -21天 , 對試驗雞連同相應的陽性和陰性對照 , 進行有無感染跡象的檢查 。試驗應至少持續10周 。
細胞培養法:這種方法的敏感性雖不如雛雞接種法 , 但簡單易行 , 仍很有實用價值 。首先要制備鴨胚成纖維細胞或雞腎細胞的培養物 , 最適宜的接種物是白細胞、腫瘤細胞或血液 。5 - 14天出現典型的mdv蝕斑 , 而對照培養物中不見這種變化 , 這就是分離到mdv的證據 。這種特征性的蝕斑 , 由圓形和梭形的折光性細胞和含有cowdrva型核內包涵體的多核細胞所組成 。
雞胚接種法:通過卵黃囊或絨毛尿囊膜途徑接種病毒的雞胚 , 分別于接種后4-6天或10-11天在絨毛尿囊膜上產生痘樣病斑 。
在實驗室診斷中 , md的血清學試驗通常用瓊脂凝膠免疫擴散試驗 , 檢測mdv抗原及其沉淀抗體 。用熒光抗體法或酶抗體法檢查病雞組織中的病毒抗原、腫瘤細胞上的腫瘤相關性表面抗原(matsa) , 也可檢測血清抗體 。用已知md陽性血清作瓊擴試驗檢查羽毛囊抗原 , 操作十分簡便 。從被檢雞身上拔下幾根含羽髓的羽毛 , 剪下含羽髓的部分放入小青瓶內 , 用玻璃棒進行適當擠壓浸提后 , 即可用于試驗 。此法敏感性高 , 人工感染mdv的雞 , 在接種20天后 , 羽髓抗原陽性率可達90%以上 。用已知mdv抗原作瓊擴試驗檢測血清抗體的方法 , 可用于來免疫發病的診斷 , 也可用于流行病學調查 。
病毒中和試驗( vn)或蝕斑減少試驗可用于檢測感染雞血清的中和抗體 。

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